表面等離子共振顯微鏡簡單介紹：
可以同時得到細(xì)胞原位明場成像、SPR成像、及SPR動力學(xué)曲線定量親和常數(shù)、結(jié)合解離常數(shù)，它為免標(biāo)記研究分子相互作用的領(lǐng)域開辟一個嶄新的前沿。專門針對細(xì)胞膜蛋白和相關(guān)分子免標(biāo)記檢測而設(shè)計的SPRm200， 使您在不需要從細(xì)胞中提取和分離膜蛋白的前提下實時觀察細(xì)胞結(jié)構(gòu)并同時測量藥物和靶點在細(xì)胞上的結(jié)合過程。還可進(jìn)行對藥物和在天然狀態(tài)下的膜蛋白之間相互作用的測量，高分辨SPR成像，可以同時實現(xiàn)單個或多個細(xì)胞的研究，從而實現(xiàn)細(xì)胞與藥物結(jié)合的異質(zhì)性及統(tǒng)計學(xué)分析。由于出色的靈敏度和穩(wěn)定性，SPRm200能夠測量納米尺度上的結(jié)合行為，可用于研究細(xì)菌或病毒與抗菌性藥物的相互作用，以及發(fā)展新型藥物載遞納米顆粒。

（1）小分子藥物（<200Da）與單細(xì)胞結(jié)合篩選與分析

（2）小分子藥物（<200Da）與多細(xì)胞/活細(xì)胞結(jié)合篩選與單個細(xì)胞精度統(tǒng)計學(xué)分布分析，研究細(xì)胞異質(zhì)性差異

（3）抗體藥物與單個/多個活細(xì)胞結(jié)合篩選與單個細(xì)胞精度統(tǒng)計學(xué)分布分析，研究細(xì)胞異質(zhì)性差異

（4）細(xì)菌或病毒與抗菌性藥物的相互作用

（5）其他分子細(xì)胞/活細(xì)胞層面原位研究

表面等離子共振顯微鏡主要功能：

實時定量活細(xì)胞分子相互作用

單個細(xì)胞/多個細(xì)胞動力學(xué)&定量分析（Ka，Kd，KD，C）及統(tǒng)計分布

明場成像、SPR成像結(jié)合單點動力學(xué)分析

生物標(biāo)記檢測, 藥物靶向研發(fā)

小分子免標(biāo)分析（<200Da）

電化學(xué)同步分析

小分子、DNA、抗體、肽段、蛋白、病毒、細(xì)菌、細(xì)胞

技術(shù)特點：

細(xì)胞原位：真正實現(xiàn)細(xì)胞層面的原位分子互作，無需提純，可以直接原位分析藥物在細(xì)胞層面與分子互作，尤其為膜蛋白受體（糖蛋白、GPCR）等提供了研究解決方案；

通量：SPR視場600um*600um，可以同時進(jìn)行多個細(xì)胞與分子互作的研究，從而實現(xiàn)藥物統(tǒng)計學(xué)分析，和細(xì)胞異質(zhì)性研究；

精度：良好靈敏度，可以實現(xiàn)<200Da 小分子藥物與細(xì)胞的互作研究；

高分辨動態(tài)可視化：可以動態(tài)可視化觀察藥物分子與細(xì)胞反應(yīng)的全過程及成像，同時可以得到定量的SPR分析曲線，從而得到定量Ka，Kd ，KD。高分辨率，1um SPR成像分辨，從而可以得到單個細(xì)胞的分辨成像與定量數(shù)據(jù)。

 技術(shù)能力：

基于原位細(xì)胞分子互作的研究

小分子藥物

常用藥物中，小分子藥物可占總量98%，小分子藥物通常是信號傳導(dǎo)抑制劑，它能夠特異性地阻斷腫瘤生長、增殖過程中所必需的信號傳導(dǎo)通路，從而達(dá)到治療的目的。多通過濃度梯度提供動力被吸收。

1. 小分子藥物與HEK 293細(xì)胞GPR39受體相互作用

圖（a）SPR成像，亮暗反映不同細(xì)胞、不同區(qū)域的結(jié)合作用的強(qiáng)弱；圖（b），明場成像，可以得到不同細(xì)胞的觀察與選區(qū)；圖（C）多個興趣選區(qū)，每個區(qū)域的SPR信號曲線，圖（e、f、g）分別為多個興趣選區(qū)，親和常數(shù)/解離常數(shù)/結(jié)合常數(shù)的統(tǒng)計分布：KD：413nM（42nM標(biāo)準(zhǔn)偏差），kd = 4.27E-3 s-1  (0.720E-3 標(biāo)準(zhǔn)偏差)，ka = 6.92E3 M-1 s-1  (0.721E3 標(biāo)準(zhǔn)偏差)

2. 小分子藥物與細(xì)胞ASIC 酸敏感離子通道受體相互作用研究

抗體藥物

單克隆抗體（mAb）療法已成為治療癌癥、自身免疫性疾病、哮喘和許多其他疾病的既定方法。單克隆抗體（mAb）藥物占整個生物制藥50%的份額，其中超過60%都是膜蛋白受體。SPRm200可以在單細(xì)胞層面定量研究單克隆抗體（mAb）和膜蛋白結(jié)合作用。傳統(tǒng)SPR是直接將純化的蛋白固定在芯片表面，對于膜蛋白而言是有問題的，膜蛋白從細(xì)胞環(huán)境中提取并保持自身形態(tài)非常困難。

基于病毒、細(xì)菌載體分子互作的研究

1.快速ASTs實驗：抗生素與大腸桿菌（Live E.Coli O157.H7）代謝活性研究

ASTs實驗是確定抗生素易感性和細(xì)菌菌株耐藥性的重要實驗。目前大多數(shù)AST實驗是基于細(xì)胞培養(yǎng)，需要幾天時間才能完成。快速AST檢測可以降低發(fā)病率死亡率和幫助制定早期窄譜抗生素治療方案。通過SPRm200，我們使用等離子成像和PIT技術(shù)跟蹤單個細(xì)菌細(xì)胞的運動。監(jiān)測隨著細(xì)胞代謝和抗生素的投入的Z向變化。可以看到，抗生素可以明顯減弱細(xì)菌細(xì)胞的活動，并且可以定量計算，從而成為快速AST檢測方法。

2. 基于SPRm200，病毒載體微陣列研究多種不同GPCR受體與配體的相互作用的研究

SPRM電化學(xué)阻抗方法定量檢測分子互作

通過電化學(xué)SPRM阻抗分析，測量了傳感器表面病毒肽配體和不同GPCR受體的結(jié)合動力學(xué)常數(shù)。

相關(guān)文獻(xiàn)（部分）

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